作者：曹慧珍

NIS-Viewer是一款可以打开.nd2格式图片的免费软件。它可以用来调节图片的亮度和对比度，添加标尺，浏览时间序列和三维序列图片，将图片以.tif格式导出。4.50版本在图像导出和多维图像展示等方面新增了一些功能，更方便大家的使用。

一、软件的安装及打开

NIS-viewer软件可以通过以下网址下载：https://www.microscope.healthcare.nikon.com/en_EU/products/software/nis-elements/v

下载后，根据提示安装到电脑上，双击桌面快捷方式打开。

二、打开.nd2格式的图片

1、点击File-Open进入Open Image对话框，选择需要打开的文件，即可打开.nd2格式的图片。

2、如果打开的图片显示为灰色，鼠标右击图片左下角任一通道名称，在弹出菜单中选择Channel Color-In color，使图片显示为彩色。

3、点击图片上方的[Split Channels]按钮可以切换到按通道分割显示（再次按下后将复原）。[Show Thumbnail of Merged All Channels]按钮可以在按通道分割显示的同时，显示出混合的多通道图像。

4、上述功能也可以通过右击图片任一位置，在弹出菜单中勾选实现--Split Component View选择图片是否分通道显示，Show Thumbnail of Merged All Channels是否显示混合的多通道图像，勾选View Channel In Color使图片显示为彩色。另外，点击Image Properties打开Image Fields对话框，可以查看图片拍摄的相关参数。

5、右击图片任一位置，在弹出菜单Rescaling Method选项勾选Quick、Linear、Spline可选择图片不同的Rescaling模式。

三、调节图片亮度对比度

若图片较暗，点击Window-Show LUTs Window打开LUTs窗口，调节图片的亮度和对比度。

左侧线条用于调整图像展示的最小值，右侧线条用于调整图像展示最大值，中间的点用于改变gamma值。右侧线条左调，线性增强图像亮度，左侧线条右调，低于该值的信号变为黑色，用于扣除背景。Gamma值G>1, 新图像比原图像暗，图片较亮的部分更清晰；G<1 , 新图像比原图像亮，图片较暗的部分更清晰；gamma值可以避免线性调节引入的过亮信号，得到更多细节信息。因gamma的调整是非线性的，文章发表时需标注具体数值。

LUTs Settings可以保存并在新的文件中调用，保证一组数据使用相同的参数进行调整。

四、添加标尺

点击图片右上角的按钮，即可添加标尺。右击标尺打开Scale Properties对话框可以调节标尺格式。

五、图片导出

点击[File]-[Export ND Document…]打开ND Export对话框。

选择图片保存位置，填写图片名称，选择导出的文件类型，如果是多维图像（3D或时间序列等），需要使用其他软件进行后续分析，可以直接导出为Multi-page TIFF。若导出Windows可直接查看编辑的图片，请选择Tagged Image Format或JPEG2000格式，推荐Tagged Image Format格式，需注意TIF Compatibility Options选择Scale 12bit to 8 bit（Windows仅支持打开8bit TIF）。

然后勾选需要的Channels，点击Export即可导出.tif格式图片。Channels选项分别表示导出各通道灰度图像(Mono image for each channel)、各通道彩色图像(Color image for each channel)、彩色混合通道叠加图像(Merge channels to RGB image)和多通道Multi-page TIFF(Keep image as multichannel)。

Tif格式的图片若需保留LUTs效果，则勾选Apply LUTs；若需标尺，则勾选Insert Overlays。注意勾选Insert Overlays后无法导出单通道图像。因此如需导出带有标尺的单通道图片，可以先导出单通道图片，然后将其在NIS-Viewer中打开，添加标尺，再导出即可。

六、Overlays

除标尺信息外，图像文件上使用NIS-Elements添加的Annotation和Binary也属于overlays。4.5版本的NIS-Viewer支持打开和导出Annotation和Binary。

七、多维图像

NIS-Viewer可以打开多维图像，如3D层扫图像、时间序列图像、多点序列图像等，图像时间轴下方显示维度。

打开Z序列图像，点击[Show Slices View]按钮：显示任意位置的任意XY、XZ、YZ剖面。点击，可显示选择位置。请用鼠标拖动十字光标。Z的显示比例可调整。

[Show Slices View]状态下：Mode选择Maximum Intensity Projection，可以显示XY的Z Maximum Intensity Projection，XZ的Y Max IP和YZ的X Max IP。

点击[ Show Volume View]按钮，即可构建三维图像，Blending可调整重建图像的混合模式，Z-zoom可调整Z方向的比例，勾选Sub volume on EGFP后，按住Ctrl鼠标即可对volume进行裁切，且仅EGFP通道；勾选Sub volume on mCherry仅对mCherry通道进行volume裁切。

[Show Tiled View]按钮：平铺显示所有帧或选中帧。

选中帧的方法：按住Ctrl单个点击slice滑块，按住Shift点击Slice滑块连续选中帧，点击鼠标右键可在当前帧中隔X帧选中一帧。

本文章版权归清华大学生物医学测试中心尼康生物影像中心所有