作者：王文娟

这篇文章介绍如何在ImageJ中进行图片校准以得到实际的长度信息和在图片上添加比例尺。

一、图片校准

我们在ImageJ中打开一张图片后经常发现图片的默认长度单位是Pixels，例如打开下面这张leaf.jpg图，图片的左上角显示的图片大小就是507X446 pixels，那么我们如何得到图片的实际大小呢？一般是需要通过一个有已知刻度的标尺进行校准，例如在这张leaf中有一把尺子。而在用显微镜成像中，也可以通过类似Fig.2 中的显微镜测微校正标尺进行初始校准。

Fig.1 示例图片leaf.jpg, 左上角显示图片大小的单位为pixel

Fig.2 显微镜测微校正标尺

下面就来看看具体如何操作吧！

采用ImageJ工具栏上的Magnifying glass放大图片上确定长度的部分，在示例图中就是图像上部的尺子。

然后用直线工具沿着尺子的刻度划线（如图中的红线）。

Fig.3 ImageJ工具栏的Magnifying Glass工具（红色方框标识）

Fig.4 沿着已知标尺用直线工具划线

在ImageJ—Analyze—下拉菜单下选择Set Scale, 将已知的划线长度和单位分别填入known distance和unit of Length 中，在本文的例子中长度1，单位为cm。

此时通过Analyze—Measure测量我们划线的长度可以看到Length中显示为1，单位就是cm。

注意：如果在Set Scale对话框中勾选Global那么设定的比例尺将适用于所有打开的图片。此时要确保所有的图片都是同一拍摄参数。

Fig.5 Set Scale 对话框

Fig.6 进行图片校准后测量结果的显示，此时测量的长度(length)的单位为cm

二、添加比例尺（Scale Bar）

图片校准后，就可以在图片上显示比例尺。

在ImageJ菜单栏中选择Analyze—Tools—Scale Bar, 打开的Scale Bar对话框中，Width定义了标尺的宽度，Height定义了标尺的高度，Font定义了标尺标签的字体大小，Color定义了标尺颜色，Background定义了标尺文本框的填充颜色，Location定义了标尺的位置，例如Lower Right就是把标尺放在右下角。Bold Text/Serif Font 分别定义了标签是粗体/Serif Font字体。勾选Hide Text 将隐藏标尺的标签。勾选Overlay 表示表示标尺以overlay形式创建在图片上，可以通过Image—Overlay—Hide Overlay隐藏或者Show Overlay显示，而不勾选Overlay则表示标尺是嵌在图片中的，不能修改。

Scale Bar的参数设定好后，点击OK，就可以在图片上显示标尺了。

Fig.7 Scale Bar设置对话框

Fig.8 显示标尺的图片

以上就是大家经常需要做的图片校准和在图片上添加比例尺的方法，这个技能Get到了吗？如有问题，请留言。

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